Immunomarquage sur cryocoupes – La technique de Tokuyasu

Nom du correspondant Melina Petrel
intervenants Melina Petrel
Objectifs Présenter les différentes étapes de préparation, de la fixation chimique à la cryocoupe, pour un immunomarquage sur coupe de tissu biologique non inclus en résine
Durée ½ journée (~3h)
Lieu de l’atelier Bordeaux Imaging Center – PIE

Université de Bordeaux

Zone Nord – Bat 1A- 3ème étage

146 rue Léo Saignat, CS 61292  33076 Bordeaux Cedex.

Dates proposées : Lundi 3 juillet de 14h à 17h et mardi 4 juillet de 9h à 12h
Nbr minimum de participants 2
Nbr maximum de participants 5
Contenu  

–       Fixation et préparation du bloc à couper (scrap et culot d’agarose/infiltration en sucrose/montage sur clou/congélation en LN2)

–       Obtention d’une pyramide pour la coupe ultrafine (surfaçage et taille des côtés)

–       Obtention de coupes ultrafine et récupération sur grilles (obtention d’un bandeau de coupes et récupération par « picking-up » avec une goutte de sucrose)

–       Explication/démo rapide d’un protocole d’immunomarquage adapté aux cryocoupes. (étapes/goutte et trick&tips pour immuno)

 

Echantillons traités Tissus et culots cellulaires